檸檬酸鈉緩沖液0. 01mol/L，pH6.0是一種常用的抗原修復(fù)液，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。可以有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而改善免疫染色效果。
通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理，而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理?？乖迯?fù)可以提高石蠟切片的免疫染色效果，亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當(dāng)冰凍切片免疫染色效果不理想時(shí)，考慮進(jìn)行抗原修復(fù)。
按照每個(gè)片子需要10ml抗原修復(fù)液計(jì)算，1L抗原修復(fù)液可以用于100個(gè)樣本的抗原修復(fù)。
檸檬酸鈉緩沖液的使用方法：
本產(chǎn)品是干粉形式，使用前用去離子水或蒸餾水按產(chǎn)品規(guī)格溶解至1L或2L，即可使用。
1、對于石蠟切片：
①脫蠟：二甲苯3次，每次3-5min→無水乙醇2次，每次3-5min→95%乙醇1次，3-5min→90%乙醇1次，3-5min→75%乙醇1次，3-5min→蒸餾水洗2次，每次3-5min。
?、诳乖迯?fù)：將切片浸泡在檸檬酸修復(fù)液中，95-100℃加熱約15min。檸檬酸修復(fù)液使用前需預(yù)熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在20-30min內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次，每次3-5 min。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
2、對于冰凍切片：
用免疫染色洗滌液洗滌切片5min。將切片浸泡在檸檬酸修復(fù)液中，95-100℃加熱約15min。檸檬酸修復(fù)液使用前需預(yù)熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在20-30min內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次，每次3-5min。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
3、對于其它樣品的抗原修復(fù)，可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進(jìn)行。
