公司動(dòng)態(tài)首頁 > 公司動(dòng)態(tài) 改善后的組織細(xì)胞固定液具有的可溶性有以下幾點(diǎn)
- 改善后的組織細(xì)胞固定液具有的可溶性有以下幾點(diǎn)
- 點(diǎn)擊次數(shù)：2352 更新時(shí)間：2019-03-28
- 組織細(xì)胞固定液是目的在于保存細(xì)胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu)，固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對(duì)自身組織和細(xì)胞的自溶、抑制細(xì)菌和霉菌的生長。固定液分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦味酸鹽類固定液等，較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。
多聚甲醛溶液(1% PFA)主要由多聚甲醛、磷酸鹽、去離子水組成，該固定液適合于絕大多數(shù)組織和細(xì)胞的固定，是免疫組織化學(xué)和培養(yǎng)細(xì)胞的固定液之一，它能較好的保護(hù)組織和細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)以及核酸。
組織細(xì)胞固定液的改善可溶性：
1、改變N端或C端：酸性肽(pH值為7時(shí)帶負(fù)電荷)我們提議；N端乙?；疌端保持自由羧基，以增加負(fù)電荷。堿性肽(pH值為7時(shí)帶正電荷)C端氨基化N段自由氨基，以增加正電荷。
2、縮短或加長序列：某些序列含有大量疏水氨基酸，如Trp、Phe、Val、Ile、Leu、Met、Tyr、Ala等當(dāng)這些疏水殘基大于50%通常難溶解。為增加肽的極性，加長序列可能會(huì)有幫助。另外一種選擇是通過減少疏水殘基的方法降低肽鏈的長度以增加極性。肽鏈極性越高，就越有可能溶于水。
3、加入可溶性殘基：對(duì)于一些極性氨基酸能改善可溶性。酸性肽可在N端或C端加上Glu-Glu.堿性肽可在N端或 C端加上Lys-Lys.若不能加入帶電荷集團(tuán)。可以將Ser-Gly-Zer加到N端或C端。但是，當(dāng)肽鏈的兩端不能改變時(shí)，此方法不行。
4、通過置換一個(gè)或多個(gè)殘基改變序列：肽鏈的可溶性可通過改變序列某些殘基來改善，一般對(duì)單個(gè)殘基的替換就能顯著改變其疏水性。而這種改變是較為保守的，如用Gly替換Ala。
5、選用不同“框架”來改變序列。
組織細(xì)胞固定液的樣品要求：
1、待標(biāo)記樣品需保證90%以上的純度，樣品中不含有干擾標(biāo)記物結(jié)合的成分，如有特殊成分，請(qǐng)?zhí)崆皹?biāo)注說明。
2、待標(biāo)記樣品蕞小標(biāo)記量為1mg，是干粉，如果是液體，濃度應(yīng)大于1mg/ml。
3、抗體IgG樣品中應(yīng)不含BSA、疊氮鈉、甘氨酸等成分。
4、大分子蛋白應(yīng)提供分子量、等電點(diǎn)、緩沖液成分及pH等信息；小分子多肽需提供氨基酸序列；小分子化合物還需提供分子結(jié)構(gòu)式。
5、請(qǐng)?zhí)崆罢f明任何特殊情況。 - 上一篇：胎牛血清10099141在日常使用中有哪些作用？
- 下一篇：介紹轉(zhuǎn)染試劑的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法是如何操作的
會(huì)員_a.png)